王祖贤（JoeyWong），1967年1月31日生于台湾台北。
1984年，首次主演电影《今年的湖畔会很冷》，其后签约邵氏电影公司到香港发展。1987年出演电影《倩女幽魂》中聂小倩，并获得当年香港电影金像奖最佳女主角提名；1992年凭《倩女幽魂Ⅲ：道道道》获得第25届西班牙锡切斯奇幻电影节最佳女主角。
1994年后王祖贤逐渐淡出影圈，1998年发行了个人国语专辑《与世隔绝》、日语专辑《Angelus》；2004年，王祖贤主演的电影《美丽上海》获得内地第二十四届中国电影金鸡奖最佳故事片奖，同年拍完电影《美丽上海》后宣布息影。
父亲王耀煌曾为台湾篮球队最年轻的国手。王祖贤继承了父亲的运动天赋，中学从崇光女中（教会学校）转至怀生国中后加入了篮球校队；外形出众的她1982年被挖掘拍摄了第一支“阿迪达斯”球鞋广告，之后进入台北国光剧艺实验学校一年多的学习。
1984年，王祖贤在台主演了电影处女作《今年的湖畔会很冷》，同时该片入围金马奖，之后签约香港邵氏电影公司并放弃了国光艺校的学业。
1985年2月《再见七日情》上映，王祖贤在香港的演艺生涯正式开始。
2001年前后，王祖贤接受台湾中天卫视《真情指数》栏目，蔡康永专访，详述了她少年时代并不顺遂的求学生涯、以及无意间踏入光影世界的经历。
在徐克、程小东于1987年联手打造的《倩女幽魂Ⅰ：妖魔道》中，王祖贤饰演女鬼聂小倩。这是部改编自古典文学名著《聊斋志异》的古装奇幻电影。
1989年9月上映的《潘金莲之前世今生》是一部独特的穿越佳作，王祖贤在饰演单玉莲。影片延续了小说妖艳诡异的风格。1989年1月，王祖贤为台影演出的新片《飞越阴阳界》尚未推出，即被韩国有邻电影交易公司出价十五万美元商购韩国版权。1月底，日本东京国际影展大会亦来函，邀请《飞越阴阳界》参加该影展灵异片类展映。8月26日，当时位列该国三大报纸之一的韩国《东亚日报》（????），根据各项数据统计出5位在韩国最受欢迎的外国明星，其中中国明星占两位，分别是王祖贤和周润发。同年王祖贤主演经典喜剧片《大丈夫日记》，与周润发等合作。
1990年7月，王祖贤在港台接戏是最忙碌的时候。《倩女幽魂》第一部大获成功后，《倩女幽魂Ⅱ：人间道》与《倩女幽魂Ⅲ：道道道》分别于90、91年推出，且各有创新，票房也延续了前作的成功。1990年3月，王祖贤应日本富士电视台邀请赴东京拍摄电视电影《香港来的女人》。1990年5月21日，在台湾阳格公司安排下，王祖贤首次踏上大陆河山拍摄广告。1990年11月，日本电影杂志《马路秀》（RoadShow）举行票选活动，王祖贤跃升为最受日本观众欢迎外国女星第一名，且之后连续几年入榜。日本影院在非热门档期推出以她为宣传点的《千年女妖》和《灵狐》等片，亦有不俗票房。
1991年6月23日，王祖贤在香港小姐决赛中担任表演嘉宾，与张学友、刘德华合演歌舞剧《红粉双雄》，与张学友合唱《每天爱你多一些》，与刘德华合唱《爱不完》，并且独唱了叶倩文的《200度》和陈淑桦的《梦醒时分》。1991年12月7日，王祖贤出席了在台北举行的第36届亚太影展，与张国荣一起颁发最佳女主角奖。
1992年冬，作为胡金铨《画皮之阴阳法王》的女主角，祖贤随剧组辗转大陆北方数地，雪中的五台山留下了她礼佛、骑马的身影。新世纪伊始，王祖贤电影生涯的最后两部重要作品《游园惊梦》与《美丽上海》也分别在内地的苏州与上海拍摄完成。截至1992年底，王祖贤为港府纳税已经超过1000万港币。
1993年3月11日，王祖贤第一张日本单曲《给我一个昨日的拥抱》发行。1993年这一年里，王祖贤分别拍摄《青蛇》、《东方不败风云再起》等七部徐克监制的影片。1993年11月，《青蛇》上映，当年在香港票房普通。1993年《马路秀》杂志票选最受日本观众欢迎十大外国女明星第六位。
2003年韩国网民票选最想念中国明星第一位，且前后三次当选。
2008年11月，该片导演徐克做客中央电视台《艺术人生》节目，其中有个“观众票选最喜爱的徐克作品”环节，结果《青蛇》票选首位。同年，作为笑傲江湖系列电影第三部，《东方不败风云再起》延续了前作的故事，王祖贤在片中饰演东方不败的侍妾雪千寻。影片中王祖贤有大量反串男装。
2001年，杨凡导演邀请王祖贤主演了电影《游园惊梦》，这是部30年代江南文化背景的电影与著名昆剧《牡丹亭》深深融合。该片在2001年被美国《时代》杂志评为十大电影之一。剧中王祖贤有双重反串的戏份——女扮男装饰演的《牡丹亭》中的多情公子柳梦梅，和现实中有几分男儿气概的民国女教师荣兰，与日本女星宫泽理惠合作。2001年4月，睽违港台影坛7年的王祖贤首次公开亮相金像奖暨香港国际电影节。2001年4月29日的闭幕式大会上，她与吴彦祖一起颁发了最佳美术指导奖。2001年10月23日，杨凡导演携王祖贤、宫泽理惠以及吴彦祖等一众主演联袂出席《游园惊梦》台湾首映晚会；10月25日王祖贤飞赴日本东京出任东京国际电影节评委。同时《游园惊梦》作为特别观摩片在东京国际电影节期间上映，王祖贤出席了该片记者会及放映会。
2003年3月21日，齐秦在北京首都体育馆举办春分演唱会，尾声时大屏幕上放出了王祖贤在加拿大拍摄的问候视频。2003年，制片人、汤臣老板徐枫女士邀请王祖贤主演内地班底影片《美丽上海》，这是王祖贤电影生涯的告别之作，她在其中饰演一位在美国工作的上海大家庭的女儿，职业是电子工程师。
王祖贤息影前最后一部电影是《美丽上海》，该电影曾于2004年参展了光州电影节，但王祖贤没有出席该活动。